苏威马立克病活毒疫苗

 

马立克病:困扰养鸡业多年,仍是一个棘手的难题

        由於可引起严重的毙死率,马立克病 ( Marek's  Disease ; MD ) 对养鸡业者利润的影响,一直是一个令人严重关切的课题。本病由一种泡疹病毒 ( Herpes  Virus ) 所引起,MD 可以引发鸡只的肿瘤、免疫抑制,以及大量的死亡。已经证实 MD 可以造成华氏囊及胸腺的萎缩而引起免疫能力的下降;更糟的是这个疾病迄今仍无药物的治疗方法。因此,养鸡要赚钱,先得解决马立克病的困扰。

肉鸡方面的马立克

        商用肉鸡感染马立克病在屠宰时可见到皮肤的肿瘤病灶 ( MD 引起的羽毛滤泡病变 )。此外肉鸡会由於免疫抑制而导致免疫力的低下,将使鸡群更容易遭受呼吸道及肠道病原的感染,使饲料效率及每日增重降低而影响整体利润。

        肉鸡接种 MD 疫苗所获得的效益在许多国家都已获得证实。这些地区包括美国、加拿大、巴西、墨西哥、义大利及日本。虽然以每只鸡为基础去评估接种效益并不容易,但以整群为基础的比较确是非常容易获得证实的。

蛋鸡、种鸡或土仿鸡遭遇马立克病侵袭将导致死亡

        较长期饲养的鸡种,如蛋鸡、种鸡、土鸡、仿土鸡等,特别容易遭受马立克病的侵袭而导致死亡,而且死亡前会拖上一段时间。MD 常可见到内脏或神经上的肿瘤,而死亡可早到八周龄左右就发生或是慢到进入产蛋期才发生。常见蛋鸡或种鸡的发病始於接近破单 ( 产第一个蛋 ),而死亡则在进入产蛋期才开始不断出现,甚至可能拖到第四十周。这种「迟发性马立克 ( Late  Marek's )」的损失特别严重,因为才要开始生产就发生无药可治的死亡,其损失可想而知。

越来越多的强毒型马立克病 ( VVMD )

        早期人们对抗 MD 使用火鸡泡疹病毒 ( HVT, FC-126株 ),它是由美国农业部 ( USDA ) 密西根州 East  Lansing 实验室开发出来的。这种天然来自火鸡的病毒在一日龄使用曾有效地控制了 MD。

        使用这种火鸡泡疹疫苗多年之後,在接种过 HVT 疫苗後又发生 MD 的鸡群上分离到许多高病原性的强毒株病毒。这些病毒株被称为强毒型的马立克病毒 ( Very  Virulent  Marek's  Disease  Virus ; VVMDV )。

马立克病毒的血清型

        下表列出马立克病毒的血清型别

血清第 1 型 血清第 2 型 血清第 3 型
所有具病原性的田间病毒株

里斯本疫苗株 ( Rispens )

经选殖处理 ( Clones ) 的里斯本疫苗株

SB-1

301B/1

 

火鸡泡疹病毒 ( HVT )

 

 

协同保护作用:血清 2 型与血清 3 型同步配合使用

        密西根州 East  Lansing 实验室中,由 Dr.Witter  做了广泛地研究,证明血清第 2 型与第 3 型的疫苗同步使用,可以提供更大的保护效力。这种效应在对抗高病原性的 VVMDV 中得到证明。事实上,在血清 2 型与 3 型同步配合使用时,在包括 28 个比较试验结果里,能够提供高出最好的单价 HVT 疫苗 50% 的保护效果。

        下表显示出血清 2 型、血清 3 型合并使用的疫苗与最好的单价 HVT 疫苗的效果比较:

        田间应用上,血清 2 型与 3 型 MD 疫苗的配合使用,已大幅降低 MD 强毒株所引发的损失,最初发展出来的 MD 血清 2 型疫苗为 SB 1 株,当与 HVT 配合使用时,能有效地降低 MD 的损失。

Dr.Witter 进一步地发现了更有效的疫苗:301B/1株

        即使 SB 1+HVT 已成功地开发出来,但长年来仍持续不断出现使用双价疫苗仍遭受 VVMDV 侵害损失的报告。Dr.Witter 及其研究小组人员发现了一个更新且有效的血清 2 型毒株 301B/1 来对抗强毒 MD 的损失。Dr.Witter 使用遗传上对 MD 抵抗力低,对接种疫苗效果差的鸡只品系,与其它的疫苗来比较。经由广泛地比较研究证实,使用 HVT+301B/1 双价疫苗能够有效地对抗包括 VVMDV 的侵袭。

MD 疫苗病毒经连续继代会减弱毒力

        以连续增殖继代方式来减低病原性,为制造疫苗上广泛使用的方法。一般而言,原由鸡只分离到的病毒,经过愈多次的继代,其毒力会愈弱。

        USDA 的密西根州 East  Lansing 实验室研究显示制造 MD 疫苗使用的病毒株,可以经由高继代 ( High   passage  level ) 的方式将病毒降到没有效果的程度下列两表表示多次继代对 SB1 病毒的影响:

wpe1C.jpg (23290 bytes)

        显微镜下可以见到 MD 病毒在鸡胚胎成纤维细胞 ( Chicken  Embryo  Fibroblast ; CEF ) 中生长发育所形成的斑点 ( Palque )。本表显示 SB 1株所产生的斑点可随病毒继代次数的增加而扩大,表示病毒已渐渐「适应 ( adapted )」在这些细胞中生长。请注意经继代 64 代及 98 代比 11 代及 23 代所形成的斑点要大。SB 1株经多次继代不但影响了斑点的大小,同时也降低了其作为疫苗的效力,下表表示随继代次数的增加,其保护力下降的情形。

wpe1E.jpg (17513 bytes)

        SB 1株在 CEF 细胞分别经 23 代、64 代及 98 代继代培养再接种鸡只後,以两株 VVMDV 攻击後,其保护力下降的差异甚大。USDA 的专家试验不同继代次数对疫苗毒株的影响,包括病毒血症出现的时间,疫苗毒在鸡只身上的生长速度等,结果高继代及低继代出现病毒血症的时间相同,表示其在鸡体内生长的速率大致相当。因此获得结论说高继代的病毒保护效果较差,因为其抗原性已改变,换句话说,在连续经 CEF 细胞继代的状况下,SB 1株的抗原性已被改变了。

        另一个改变为疫苗病毒散布的能力经种子毒株在长期继代後也发生改变。疫苗病毒在鸡舍内的散布对鸡群免疫力的提升相富有助益。

并非所有的马立克疫苗其种子毒都经过相同的继代

        在经过较高继代之後,马立克疫苗病毒可以引发较大、较容易观察到的斑点。由於这种成斑单位 ( Plaque  Forming  Unit ; PFU ) 分析法,需要计算可检视的斑点,较高继代的疫苗似乎能形成较高的 PFU 值,但是我们认为较高的 PFU 计数值,并不与疫苗在鸡只所表现的保护力相当。

        苏威公司制造低继代的马立克疫苗以确保鸡群接种後能获得大的保护效果。其它疫苗公司采用较高继代方式,以获取较高的 PFU 值,因而降低生产成本。

结论

        .低继代的马立克疫苗具有更好的保护力。

        .高继代的马立克疫苗效力较差。

        .继代次数曾影响 PFU 值,而 PFU 的计算为目前马立克疫苗的评估方式之一。

        例如:同样为 5000 PFU 的疫苗,低继代的会比高继代的更有效。

        .高继代方式制造的马立克疫苗,在鸡群之间散布疫苗毒的能力不如低继代方式制造的马立克疫苗。

        .苏威公司使用低继代方式处理种子毒株,以获取最大的保护效力,而非仅仅重视表面的 PFU 值。

        .并非所有的厂商都使用低继代毒株制造马立克疫苗。

        许多孵化场购买 MD 疫苗时,往往只比较疫苗的价钱,而忽略了这个重要的因素。我们提供这讯息并让大家知道,疫苗的实际品质应该是购买 MD 疫苗时最重要的考虑因素。并非所有的 MD 疫苗品质都相同,而苏威疫苗已经设立了疫苗工业品质的新指标。

wpe21.jpg (78484 bytes)

301B/1株的优异特性

        由於 SB 1株已获取成功经验,因此必需对 301B/1株做广泛地的试验以证实它是更好的疫苗毒株。在 Dr.Witter 的试验中发现,不论是 301B/1株或 SB 1株,疫苗操作的正确与否对疫苗毒在鸡群间的散布能力非常重要。他发现疫苗接种正确时,两株都可以在鸡群内建立起疫苗毒血症。他也发现母鸡移行抗体的干扰,在血清 2 型的疫苗不若血清 1 型的那麽显着。

        疫苗接种後攻毒试验显示出 SB 1株与 301B/1株保护效果的差异。左列四个表是 Dr.Witter 所作的试验结果,比较不同毒株攻毒之後,各种疫苗所能提供保护效果的差异表现。

        下表显示在 11 个月不同试验中,不同疫苗之间保护力的差异

wpe23.jpg (18190 bytes)

        另外的分析报告指出,HVT+301B/1 与 HVT+SB 1 分别合并使用後的效果差异。在 29 个比较试验中,20 个试验为 301B/1+HVT 的效果较佳,只有 6 个报告为 SB 1+HVT 较佳,另 3 个则效果相同。

        根据这些试验的结果仔细分析,Dr.Witter 作出结论:HVT+301B/1的保护效果在统计上比 HVT+SB 1为佳。苏威公司即依此开发出商业化的 301B/1株疫苗,而在苏威的研究结果,也证实 301B/1确实比 SB 1疫苗更好。

苏威 VVMD Vac 马立克疫苗 HVT+301B/1双价合一:最有效的保护效果

        为了减少孵化室人员需操作溶解两种疫苗的处理程序,苏威公司将 HVT 与 301B/1疫苗病毒合制成单一瓶的疫苗。这种方式也降低了运送桶子、补充液氮等处理成本。

        具有世界上最大的马立克疫苗生产药厂的经验,加上最严格的品管控制程序,苏威公司确保所生产的 VVMD vac 疫苗能提供业者对抗极强毒型马立克病造成的损失。

用法用量:

        本疫苗需使用苏威 MD 稀释液稀释溶解混合後使用

        A.鸡体注射:一日龄健康鸡只,每只注射 0.2 ml

        B.蛋内接种:采用 EMBREX   INOVOJECT 蛋内接种系统

注意事项:

        1.鸡体注射时,每瓶 1000 剂量疫苗可溶解稀释於 200 ml 的 MD 稀释液。

        2.MD 稀释液需於室温保存,不得冷藏。请存放於阴凉处。

        3.本疫苗操作需极小心,务必依原厂规定:

        A.稀释液内勿添加任何抗生素或其它药物。

        B.溶解疫苗请用 27℃清水。

        C.解冻後抽取疫苗,使用 1.5 英寸 ( 3.8 公分 ) 之 18 号针头。注入稀释液後需再回抽冲洗疫苗玻璃瓶壁 ( Rinse )。

        D.接种注射器上使用 1/2 英寸 20 ~ 22 号针头,每注射 1000 ~ 2000 只小鸡应更换一次针头。

        E.器材使用後以煮沸方式消毒,勿用化学药品消毒。

        F.一次溶解一支疫苗,稀释後需於 1 小时内使用完毕。

        G.随时检查桶中液氮的高度。任何时候桶中液氮高度不得低於 4 英寸 ( 10 公分 ),贮存、运送及操作都必需小心谨慎进行。

        H.小鸡运抵商用鸡场後 1 至 14 日龄内务必严格隔离。育雏舍应与中、大鸡舍分开或远离。

        I.避免感染抑制免疫系统的疾病,如甘保罗病、霉菌毒素…等。

        J.本疫苗勿与里奥活毒混合使用。

        ( 东盈公司提供 )

 

中国畜牧杂志第30卷(98)第 7 期 ( 83 ~ 88 )

Copyright © 1998 茂群峪畜牧网. 本网站图文系属茂群峪有限公司,内文之版权为该杂志社所有,非经本公司
及该杂志社正式书面同意,不得将全部或部分内容,转载於任何形式媒体   ※ 最佳解析度 800x600
Copyright © 1998 MiobufferCo., Ltd.  All rights reserved.
Unauthorized copying and reproduction is prohibited. All trademarks property of their respective holders.