预防猪放线杆菌胸膜肺炎
(下)
ACTINOVAC疫苗介绍
4.效 力
4.1一般的考量
有许多方法可以证明疫苗的效力,目前常依疫苗的种类而用检验室检测法和动物检测法检定疫苗效力。动物检测法又分为接种在实验动物 ( 小白鼠 ) 和接种在标的动物。以血清学检测法检定免疫反应不失为可靠之效力检定法。但以标的动物进行攻击检测是评估接种疫苗所产生保护力的最明确方式。
最近常见以猪胸膜肺炎放线菌菌苗进行攻击实验的报导;因而以鼻腔内感染的方式将某种有毒力胸膜肺炎放线杆菌的培养物接种在注射过 ACTINOVAC 及未注射过 ACTINOVAC 的猪只身上以评估 ACTINOVAC 的保护效力;评估时以多种临床及病理变数来比较二组的不同。
4.2以小白鼠为实验对象所做的初步测试
实验设计
将 96 只小白鼠分为 3 组,各注射不同的实验物,一组注射含 ApxⅠ的 ACTINOVAC,一组注射不含 ApxⅠ的 App 疫苗,另一组则注射安慰剂 ( 未接种疫苗的对照组 )。各组小白鼠都以三周为间隔各注射二剂。同等周数後,在各组中选同等数量的小白鼠,以人工感染的方式接种 App 血清型 1、2、5b 和 9,并观察记录其後各组的死亡率。
结 果
本实验结果列在表 5,实验结果显示接种含 Apx IACTINOVAC 的小白鼠对 App 血清型 1、2、5b 等含於疫苗中的菌株有良好的保护力,甚至对未含於疫苗中的 App 血清型 9 也有良好的保护力。实验结论可以说,由於疫苗中含溶血素因而对未含在疫苗中的 App 血清型因交叉作用而有良好的保护力。
4.3以 App 血清型 1 进行猪只的攻击实验
实验目的
本实验目的在於显示 ACTINOVAC 在实验条件下的效力,比较 ACTINOVAC 接种组和对照组在受到鼻腔接种具毒力的 App 血清型 1 後,在临床、病理、细菌学和血清学方面的表现。
表 6:攻击後小白鼠的死亡率
血清型菌株 | 疫苗 | 6小时 | 18小时 | 42小时 | 66小时 | 死亡总数 |
後小白鼠死亡头数 | ||||||
1 4074
|
控制 10499H 10499K |
8 1 3 |
8/8 1/8 3/8 |
|||
2 5411
|
控制 10499H 10499K |
6 2 2 |
2 1 3 |
2 |
1 |
8/8 3/8 8/8 |
5b L20
|
控制 10499H 10499K |
8 1 6 |
1
|
8/8 2/8 5/8 |
||
CVI13261 | 控制 10499H 10499K |
8 3 8 |
2
|
8/8 5/8 8/8 |
H=含溶血素的疫苗
K=不含溶血素的疫苗
实验设计
实验取用 14 头年龄在 7 至 9 周龄的瑞士蓝瑞斯品种猪只,其中 7 头以三周为间期,肌肉注射二次 ACTINOVAC 各 2 毫升;另 7 头则注射安慰剂。二周後所有的猪只都以鼻腔内接种法接受毒力极强的 App Shope 4074 号菌株的攻击,观察并记录猪只的临床反应,所有死亡猪只都进行剖检,未死亡的猪只在攻击後 48 小时给予安乐死,并进行剖检。
临床徵状
表 7 列出临床徵状;人工感染的确在未接种疫苗对照组猪只引起极严重的临床症状。所有受 App Shope 4074 号菌株攻击的猪只都拒食,其中四头显示出呼吸症状,甚至有一头在 48 小时内死亡;但在未接种疫苗组中只有两头猪只表现出轻微的呼吸症状。
表 7:14 头接受 App 攻击实验猪只的临床徵状
临床徵状 | 接种组 | 未接种组 |
呕吐 | 1x+ 6x- |
- 7x- |
呼吸困难 | 2x+ 5x- |
5x+ 2x- |
分泌物 | - 7x- |
1x+ 6x- |
咳嗽 | - 7x- |
1x+ 6x- |
拒食 | - 7x- |
7x+ - |
死亡 | 无 | 1 |
剖检所见:
表 8 列出死後剖检的各项发现,剖检所见和临床徵状互为表里。未接种疫苗组的猪只,除了一头没有严重的胸膜肺炎的变化外,其馀各头在下呼吸道都有明显的胸膜肺炎病变;接种疫苗组的猪只只有一头显示出肺部的病变。
表 8:以绩分系统比较病理所见和细菌学所见
病变 | 接种组 | 未接种组 |
胸腔外部病变 | 0 | 13 |
肺 | 25 | 61 |
渗出物 | 5 | 21 |
胸膜 | 9 | 20 |
心脏 | 0 | 9 |
肺部分离 App | 15 | 18 |
器官分离 App | 0 | 3 |
各组总点数 | 54 | 145 |
血清学的评估
表 9 12 示出抗溶血素和血清型 1、9 及 11 血清学检测结果。
表 9:以免疫墨点法检测抗溶血素的结果
组 别 | 猪只头数 | 第一次接种前 | 第二次接种前 | 攻击前 |
接 种 | 7 | 7x- | 4x+ 3x- |
7x+++
|
未 接 种 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
表 10:以补体结合反应检测抗 App 血清型 1 抗体的检测结果
组 别 | 猪只头数 | 第一次接种前 | 第二次接种前 | 攻击前 |
接 种 | 7 | 7x- | 4x 1:10 3x 1:20 |
7x 20
|
未 接 种 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
表 11:以补体结合反应检测抗 App 血清型 9 抗体的检测结果
组 别 | 猪只头数 | 第一次接种前 | 第二次接种前 | 攻击前 |
接 种 | 7 | 7x- | 3x 1:10 1x 1:20 |
5x 1:10 2x 1:20 |
未 接 种 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
表 12:以补体结合反应检测抗 App 血清型 11 抗体的检测结果
组 别 | 猪只头数 | 第一次接种前 | 第二次接种前 | 攻击前 |
接 种 | 7 | 7x- | 4x 1:10 1x 1:20 2x- |
1x 1:10 6x 1:20
|
未 接 种 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
4.4野外实验
实验大纲
在某一App 死亡率相当高的肉猪场进行一项大规模野外实验,实验肉猪共分为三组,每组各有 300 头仔猪。第一组不接种疫苗,做为对照组;第二组接种不含溶血素的 App 菌苗 ( 血清型 1、2、4 及 5b ),第三组接种 ACTINOVAC。在下述时间内死亡的猪只都进行剖检,剖检时特别着重下呼吸道的变化。
接种时间表
第一次接种:10 周龄时
第二次接种:12 周龄时
第三次接种:16 周龄时
结 果
这项野外实验的实验结果示於表 12。
表 12:剖检死於 App 的猪只时的肺部所见
组 别 | 猪只 头数 |
死亡 猪只 头数 |
因 App 而 死亡的猪 只 总 数 |
尸解 所见 |
在第二次接 种後死亡猪 只 头 数 |
死亡 猪只 头数 |
发生 App 年 龄 |
年龄 |
10 - 12w | 12 - 16w | 18 - 20w | ||||||
对照组 Ⅰ | 300 | 21 | 17 | 17 | 13 | 4 | 9 | 4 |
90710 Ⅱ | 300 | 34 | 10 | 10 | 6 | 4 | 6 | 0 |
90721 Ⅱ | 300 | 7 | 7 | 6 | 2 | 5 | 2 | 0 |
(1)显示典型的胸膜肺炎徵状
由肺部病变区分离出 App 血清型 1 及 2。
结 论
本实验证明接种 ACTINOVAC 组的猪只在接种後的死亡率较对照组猪只或接种不含溶血素 App一菌苗组猪只的死亡率低很多。
5.产品概要
.疫 苗
ACTINOVAC 是一种菌苗次单位疫苗
.含大量溶血素 1
ACTINOVAC 提供的交叉免疫作用能有效对抗数种毒力甚强的 App 血清型 ( 血清型 1、5a、5b、9、10、11 )
.同时也含有溶血素Ⅱ及Ⅲ
ACTINOVAC 对所有其他血清型也提供某种程度的交叉免疫保护作用。
.含有多种具代表性的血清型
ACTINOVAC 含荚多醣类和脂多醣类抗原,所以能提供交叉免疫作用
.保护效果以毒力甚强的血清型 1 菌株攻击感染证明有效
ACTINOVAC 对毒力极强的 App 血清型 1 的效果业经证明
.保护效果经现场实验证明有效
ACTINOVAC 的良好临床效果业经野外实验证明
.以大量猪只进行过广泛的耐受性实验
猪只对 ACTINOVAC 有良好的耐受性
.标准剂量
ACTINOVAC 各类猪只用量均为 2 毫升
结 论
ACTINOVAC 是利用对 App 抗原最新认知所开发出的现代化疫苗,含有刺激猪只产生保护性免疫力的多种主要抗原,是一种多价疫苗,对多种强毒血清型都能产生保护作用。同时含有影响毒力的重要因子,次单位成分 ( ApxⅠ),这项毒力因子见於 App 血清型 1、5、9、10 及 11。ACTINOVAC 也含有 Apx Ⅱ 和 Apx Ⅲ等次单位,再加上菌体所含的荚膜多醣类和脂多醣抗原,使得 ACTINOVAC 不仅能有效防止其所含血清型菌株的感染,同时对其他血清型也有某种程度的交叉保护作用,能有效预防猪场爆发急性胸膜肺炎。
猪只接种 ACTINOVAC 後能有效对抗毒力强大的 App 血清型 1,这一点业经人工感染的攻击实验以及现场的野外实验证实。有了对强毒血清型 1 的保护作用就代表 ACTINOVAC 的品质的确有保证,对其他血清型也会有相同的保护效果。
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中国畜牧杂志第五十六册合订本
1996年七月号至1996年十二月号
第 28 卷 (96) 第 12 期 ( 121 ~ 127 )
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