应用Quinolone 类之 Ofloxacin
於肉用种鸡之混合型呼吸器病清除计划
林子恩 涂庆霖 李宗玄
国立中兴大学兽医学系 国立中兴大学兽医学研究所
摘 要
本实验利用一肉用种鸡群,探讨混合型慢性呼吸器病 ( CCRD ) 病原清除计划之田间试验。试验鸡在育成期间,分别饮水投与 Ofloxacin ( 每公斤体重 10 毫克 ) 和 Tiamulin ( 每公斤体重 15 毫克 ),每个月投药一次做为清除计划之使用药物,Ofloxacin 投药组之试验鸡表现明显的生长成绩,低迈可菌 ( MG ) 血清阳性率,良好的产蛋率和孵化率。本实验亦针对大肠杆菌和 MG 分离株进行 Ofloxacin 及其他 5 种抗菌剂之耐药性试验,由试验结果显示,每个月使用一次 Ofloxacin 将可建立良好的 CCRD 清除计划。
绪 言
世界上许多地方肉鸡场常因感染 MG 所引起之 CRD 而造成重大的经济损失。近年来,因二次感染 E. coli 而造成严重之 CCRD 有增加的趋势。CCRD 往往慢慢才出现临床症状,病程长,剖检可见严重之气管炎、纤维素性心包炎及肝包炎。肉鸡场多由祖系种鸡场垂直感染或到达肉鸡场时已受到 MG 感染。
MS 感染各年龄层鸡苹已散布世界各地,引起传染性滑膜炎,少数 4 ~ 6 周龄生长阶段之禽类会有呼吸症状。
Fluoroquinolones 是新型人工合成药物,用於许多家畜、家禽及鱼类细菌性疾病之控制。具有相当广效之抗菌性,包括抗革兰氏阳性、阴性之细菌及麦可菌。这类新 Quinolones 类药物,细菌对其有很低的抗药性,因细菌 DNA gyrase 低变异的特性。
大多数由无 MG 感染之鸡场引进之小母鸡,至产蛋时却常受到污染。因此原料鸡场 MG 之清除计划对後裔肉鸡场 MG 之清除显得相当重要。许多有关小母鸡 MG 之防疫研究正在进行。
然而,他们对引起 CCRD 之病原,尚未能有效地控制。此次试验,希望利用 Ofloxacin 进行种鸡场 CCRD 之清除计画,而维持种鸡场无 MG 污染之状态。
材料和方法
实验计画
将实验鸡分两组,分开饲养,以两种抗 CCRD 药物处理 ( 表 1 ),C 组则不予药物处理。
表 1 应用 Ofloxacin 及 Tiamulin 进行混合型呼吸器病 ( CCRD ) 清除计画肉用种鸡之分组
组别 | 鸡 数 | 试验期间 ( 日 ) |
CCRD 清除计划 | ||
产蛋前 | 产蛋後 | 药物 | 剂量 ( mg/kg, BW ) | ||
A B C |
3,000 3,000 100 |
2,500 2,500 --- |
252 252 96 |
Ofloxacin Tiamulin --- |
10 15 --- |
於 1 ~ 3、28 ~ 30、56 ~ 58 及 84 ~ 86 日龄时,分别於饮水投药 3 天,全部实验时间由 1 日龄至 252 日龄。
药物
OXLADIN ( 为一种 Ofloxacin 之商品 ) 及 TIAMUTIN ( 为一种 Tiamulin 之商品 ),由原制造商 Nippon Daiichi Seyaku 及 Sandoz 分别购得。
OXLADIN 为含 5%Ofloxacin 之酸性溶液,属於新 Quinolones 类。对照用药 TIAMUTIN 则为 Tiamulin 粉末。
实验用鸡
乃由 Arbor Acres ( AA ) 种鸡场购得,以限食方式饲养,并依照 AA 公司管理计画说明书之防疫计画管理。
观察及采样
检查每天之生长情形及摄食情形。於 7、40、68 及 96 日龄时采血,蛋鸡则於产蛋期第 231、238、245 及 252 日龄时采血,而於 7、40、68 及 96 日龄时作病原分离。产蛋记录则由开始产蛋至 36 周龄止,并记录 33 ~ 36 周龄期间之孵化率及淘汰率。
凝集试验
MG 及 MS 抗体利用快速平板凝集法测试。抗原乃由 INTERVET 公司 ( 荷兰 ) 购得。
麦可菌之分离
麦可菌初代分离及培养乃利用含 10%马血清、酵母抽出液及抗生素之麦可菌培养液。而麦可菌菌落则培养於二氧化碳培养箱中,利用麦可菌琼脂培养。以棉棒由气管及气囊采样,再将棉棒投至装有培养液之试管中,培养於 37℃,5%二氧化碳培养箱中,而 E. coli 则以 Maclonkey agar 分离。
药物敏感试验
E. coli 及麦可菌药物敏感试验以 Bauer - Kirby disc zone method 及最小抑菌 ( MIC ) 浓度及最小杀菌浓度 ( MCC ) 之生长抑制试验进行。E. coli 药物敏感试验所用之 discs 由 Showa 公司购得,而分离株则由各年龄层所作之分离而得到的。
结 果
MG 及 MS 抗体
表 二为 Ofloxacin 治疗组与 Tiamulin 治疗组及不治疗组血清阳性率之比较。产蛋前 A 组 ( 即 Ofloxacin 治疗组 ) MG 及 MS 阳性率为 0 ~ 5.3%,而 B 组 ( 即 Tiamulin 治疗组 ) 为 0 ~ 20%,而不治疗组为 40 ~ 100%。治疗组在产蛋期 MG 阳性率为 A 组 0 ~ 5%及 B 组 0 ~ 10%。
表 2 CCRD 清除计画使用 Ofloxacin (A) 及 Tiamulin (B) 於肉用种鸡 MG 及 MS 抗体分布情形
日 龄 ( 日 ) |
组 别 | 鸡 数 | 阳性率 ( % ) | |
MG | MS | |||
7 | ---2 | 22 | 0 ( 0 ) | 1 ( 5.3 ) a |
40 | A B C3 |
19 20 15 |
0 ( 0 ) a4 2 ( 10 ) a4 6 ( 40 ) b |
1 ( 5.3 ) a 4 ( 20 ) a 9 ( 60 ) b |
68 | A B C |
15 15 15 |
0 ( 0 ) a 0 ( 0 ) a 10 ( 66.7 ) b |
0 ( 0 ) a 1 ( 6.7 ) a 12 ( 80 ) b |
96 | A B C |
15 15 15 |
0 ( 0 ) a 1 ( 6.7 ) a 12 ( 80 ) b |
0 ( 0 ) a 1 ( 6.7 ) a 15 ( 100 ) b |
231 1 | A B |
20 20 |
0 ( 0 ) a 1 ( 5 ) a |
---5 --- |
238 1 | A B |
20 20 |
0 ( 0 ) a 1 ( 5 ) a |
--- --- |
245 1 | A B |
20 20 |
1 ( 5 ) a 1 ( 5 ) a |
--- --- |
252 1 | A B |
20 20 |
1 ( 5 ) a 2 ( 10 ) a |
--- --- |
1.由受精卵孵出後小鸡之血清
2. 7 日龄前没分组
3.无治疗对照组
4. p<0.05,各年龄有显著差异
5. ---∶没作
麦可菌及大肠杆菌之分离
表 三 为各组之分离率。A 组 MG 及 E. coli 之分离率分别为 0 及 ~ 6.67%,而 B 及 C 组 MG 之分离率为 0 ~ 6.67% 及 33.3 ~ 93.3%,而 E. coli 之分离率分别为 0 ~ 6.67% 及 33.3 ~ 100%。
表 3 产蛋前麦可菌及大肠杆菌分离结果
组别 | 处 置 | 分离菌株 | 离离率 ( % ) | ||
40D1 | 68D | 96D | |||
A B C |
Ofloxacin Tiamulin 未投药 |
Mycoplasma Mycoplasma Mycoplasma |
0 a2 0 a 33.3 a |
0 a 0 a 73.3 b |
0 a 6.67 a 93.3 b |
D E F |
Ofloxacin Tiamulin 未投药 |
E. coli E. coli E. coli |
0 a 0 a 33.3 a |
0 a 0 a 80 b |
6.67 a 6.67 a 100 b |
1. D∶麦可菌及大肠杆菌分离时之日龄
2. p<0.05,各病原分离有显著性差异
药物敏感试验
利用 4 个 MG 分离株及 9 个 E. coli 分离株进行此试验,结果如表 4 及表 5 所示。6 种测试用药物为 Ampicillin ( AMPC )、Oxytetracyclin ( OTC )、Doxycyclin ( DOXY )、Ofloxacin ( OFLX )、Erythromycin ( EM ) 及 Ciprofloxacin ( CPFX )。
表 4 麦可菌分离株对 Ofloxacin 及其他抗菌剂之 MIC 及 MCC 试验
麦可 分离株 |
来源 | 分离日龄 | 试验 | 抗 菌 剂 * | |||||
AMPC | OTC | DOXY | OFLX | EM | CPFX | ||||
23ˉT5 | A | 40 | MIC MCC |
--- --- |
2 3** 2 2 |
2 5 2 4 |
2 7 2 6 |
2 4 2 3 |
2 4 2 3 |
24ˉ6T | B | 40 | MIC MCC |
2 1 --- |
2 2 2 2 |
2 4 2 4 |
2 7 2 7 |
2 4 2 3 |
2 5 2 5 |
C1 | C | 68 | MIC MCC |
--- --- |
--- --- |
2 3 2 3 |
2 5 2 4 |
--- --- |
2 5 2 5 |
BT2ˉ1 | B | 96 | MIC MCC |
--- --- |
2 3 2 1 |
2 5 2 4 |
2 7 2 6 |
2 5 2 3 |
2 5 2 5 |
*内含药物浓度 ( ug/ml )
AMPC∶Ampicillin 30
OTC∶Oxytetracyclin 200
DOXY∶Doxycyclin 200
OFLX∶Ofloxacin 30
EM∶Erythromycin 50
CPFX∶Ciprofloxacin 10
表 5 E. coli 分离株对 Ofloxacin 及其他抗菌药物药片之敏感试验
大肠菌 分离株 |
来 源 | 分 离 日 龄 |
敏感性试验药物药片 | |||||
AMPC | OTC | DOXY | OFLX | EM | CPFX | |||
5T 7T 8T 9T 10T 24 - 2 23 - 1 C4 C5 |
A B B C C B A C C |
40 40 40 40 40 96 96 96 96 |
-2 - - - -2 - - +++ - |
- - - - - - - - - |
- - + ++ + - - - + |
+ + + ++ + + ++ ++ +++ |
- + - ++ - - - + ++ |
+ + - ++ + + ++ ++ +++ |
1 AMPC∶Ampicillin
OTC∶Oxytetracyclin
DOXY∶Doxycyclin
OFLX∶Ofloxacin
EM∶Erythromycin
CPFX∶Ciprofloxacin
2 抗药性∶-抗药性
+抑制圈达敏感性
产蛋率及孵化率
图 1 表示由产蛋开始至 36 周龄产蛋高峰之平均产蛋率 (%)。A 组於 23 周龄开始产蛋,B 组则於 24 周龄开始,而两组产蛋高峰时 ( 33 ~ 36 周龄 ) 平均产蛋率分别为 82.83% 及 80.17%。
图 2 表示受精母鸡於 33、34、35 及 36 周龄之受精率及淘汰率。
讨 论
呼吸性疾病之防治得视病因而定,灰尘及氨气之控制相当重要,另外防止呼吸病原性病毒侵入鸡场亦相同重要。对许多生产鸡国家,麦可菌感染之防治已成呼吸道疾病控制之重要课题。因为 MG 可藉蛋传播,故得加强种鸡场之防治,一旦种鸡受到感染,将终生带菌,且可藉蛋传播病原。
台湾 MG 血清调查由林及蔡所进行。
种鸡场高血清阳性率 ( 79.8% ~ 86.7% ),显示种鸡场将造成严重之 MG 垂直传染。此试验,我们利用抗麦可菌药物 Ofloxacin 及 Tiamulin 於1ˉ4ˉ8ˉ12 周龄时进 MG 清除计划。期间於鸡苹 1 ~ 3,28 ~ 30、56 ~ 58 及 84 ~ 86 日龄时以饮水给药 3 天,而两种药物均可降低 MG 及 MS 之血清阳性率,此计画希望能抑制 MG 之污染浓度,调查显示产蛋鸡血清阳性率亦明显下降,具此推断清除计画应可有效改善垂直传染情形。
此次试验以 4 个 MG 分离株及 9 个 E.vcoli 分离株进行药物敏感试验,它们大部分对 Ampicillin、Oxytetracyclin、Doxycyclin 及 Erythromycin ( 表 4 及 5 ) 有抗药,而属於新 Quinolone 药物的 Ofloxacin 及 Ciprofloxacin 则显示对 MG 及 E.coli 具有良好之抗菌能力。虽然用以试验之分离株不多,但田间因抗药性问题面爆发 CCRD 却时有所闻。
对 CCRD 清除计画对说,新 Quinolone 之 Ofloxacin 显然是一有效之药物,以 Ofloxacin 治疗的鸡,不但 MS 及 MG 血清阳性率降低许多,且於 96 日龄前亦有较低之 MG 及 E. coli 分离率 ( 表 3 ),产蛋开始,可有较高之孵化率 ( 图 1 ) 且健康鸡苹有较低之抗体 ( 表 2 );肉鸡种鸡场因有较高之孵化率及较低之淘汰率 ( 图 2 ) 而可提高利润。
台湾肉鸡场感染 CCRD 之可能性相当高是一事实,要减少肉鸡损失最有效办法乃生产更多无 CRD 带原的鸡,在此试验中,我们建立了 Quinolone 类药物所进行肉种鸡场 ccrd 清除计画。
Ofloxacin 即为抗CCRD 药物之一例,而疗效的评估,有待进一步的实验调查。
感 谢
我们十分感离中兴大学郭维贞、赵沁梅及翁欣怡小姐的协助,另外,编者亦非常感谢景旦鸡场陈敦男先生提供实验鸡舍及收集受精卵或孵化鸡苹。
( 原文刊载於∶台湾畜牧兽医学会杂种 64 期。翻译稿提供∶台湾第一制药公司 )
中国畜牧杂第五十三册合订本
1995年一月号至1995年六月号
第 27 卷 (95) 第 5 期 ( 113 ~ 118 )
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