猪只人工授精技术手册
(四)
郭有海.蒋荣章
麦管式公猪冷冻精液之制作流程
1.采集公猪浓厚精液 100 ~ 150 ml
2.使用位相差显微镜检查精液性状
3.将浓厚精液置於室温维持 1 ~ 2 小时
4.稀释浓厚精液
5.稀释之精液冷却至 15℃ 4 小时
6.稀释之精液在 15℃情况下远心分离 ( 2000 r.p.m ) 10 分钟
7.弃除上层澄精液
8.精子悬浮於冷却稀释液中
9.稀释之精液置於 5℃ 2.5 小时
10.使用冷冻稀释液稀释精液
11.将 5ml 之精液添装入麦管後,使用不锈钢珠或塑胶珠子塞进麦管之两端,并将麦管中之气泡移至中央
12.将麦管移入盛有液氮的保利龙盒内之架子上,利用液氮雾气冷冻 20 分钟
13.移入液氮桶内贮存
麦管式公猪冷冻精液之解冻流程
1.尽速由液氮桶内移出一支麦管
2.将麦管放入 52℃之温水内 45 秒
3.擦乾麦管表面之水份,并将麦管之端剪开
4.再剪开麦管之另一端,让精液流入 80 ml 25℃稀释液中
5.使用相差显微镜检查解冻後之精液性状
6.制备麦管式冷冻精液及解冻液配方
7.将解冻之冷冻精液尽速给予授精
(1) 公猪新鲜精液稀释液配方
组成份 | 重量 ( 克 ) |
Glucose Citric acid , trisodium salt Sodium bicarbonate Citric acid EDTA Tris BSA Cysteine Penicillin Streptomycin 去离子蒸馏水加至 |
25.00 6.90 1.00 2.00 2.25 5.65 3.00 0.05 0.60 1.00 1 公升 |
(2) 冷却稀释液配方
组成分 | 含量 ( 毫升 ) |
11% lactose solution Egg yolk |
80.0 20.0 |
(3) 冷冻稀释液配方
组 成 分 | 含量 ( 毫升 ) |
11% lactose solution Egg yolk Glycerin Orvus - Es - Paste ( OEP ) |
80.0 20.0 7.2 1.6 |
(4) 解冻稀释液配方
组 成 分 | 含量 ( 克 ) |
Glucose Trisodium citrate dihydrate Sodium bicarbonate EDTA Potassium chloride Penicillin Streptomycin 去离子蒸馏水加至 |
35.000 3.703 1.201 3.702 0.350 0.500 0.500 1 公升 |
中国畜牧杂志第五十三册合订本
1995年一月号至1995年六月号
第 27 卷 (95) 第 1 期 ( 56 ~ 60 )
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