預防豬放線桿菌胸膜肺炎
(下)
ACTINOVAC疫苗介紹
4.效 力
4.1一般的考量
有許多方法可以証明疫苗的效力,目前常依疫苗的種類而用檢驗室檢測法和動物檢測法檢定疫苗效力。動物檢測法又分為接種在實驗動物 ( 小白鼠 ) 和接種在標的動物。以血清學檢測法檢定免疫反應不失為可靠之效力檢定法。但以標的動物進行攻擊檢測是評估接種疫苗所產生保護力的最明確方式。
最近常見以豬胸膜肺炎放線菌菌苗進行攻擊實驗的報導;因而以鼻腔內感染的方式將某種有毒力胸膜肺炎放線桿菌的培養物接種在注射過 ACTINOVAC 及未注射過 ACTINOVAC 的豬隻身上以評估 ACTINOVAC 的保護效力;評估時以多種臨床及病理變數來比較二組的不同。
4.2以小白鼠為實驗對象所做的初步測試
實驗設計
將 96 隻小白鼠分為 3 組,各注射不同的實驗物,一組注射含 ApxⅠ的 ACTINOVAC,一組注射不含 ApxⅠ的 App 疫苗,另一組則注射安慰劑 ( 未接種疫苗的對照組 )。各組小白鼠都以三週為間隔各注射二劑。同等週數後,在各組中選同等數量的小白鼠,以人工感染的方式接種 App 血清型 1、2、5b 和 9,並觀察記錄其後各組的死亡率。
結 果
本實驗結果列在表 5,實驗結果顯示接種含 Apx IACTINOVAC 的小白鼠對 App 血清型 1、2、5b 等含於疫苗中的菌株有良好的保護力,甚至對未含於疫苗中的 App 血清型 9 也有良好的保護力。實驗結論可以說,由於疫苗中含溶血素因而對未含在疫苗中的 App 血清型因交叉作用而有良好的保護力。
4.3以 App 血清型 1 進行豬隻的攻擊實驗
實驗目的
本實驗目的在於顯示 ACTINOVAC 在實驗條件下的效力,比較 ACTINOVAC 接種組和對照組在受到鼻腔接種具毒力的 App 血清型 1 後,在臨床、病理、細菌學和血清學方面的表現。
表 6:攻擊後小白鼠的死亡率
血清型菌株 | 疫苗 | 6小時 | 18小時 | 42小時 | 66小時 | 死亡總數 |
後小白鼠死亡頭數 | ||||||
1 4074
|
控制 10499H 10499K |
8 1 3 |
8/8 1/8 3/8 |
|||
2 5411
|
控制 10499H 10499K |
6 2 2 |
2 1 3 |
2 |
1 |
8/8 3/8 8/8 |
5b L20
|
控制 10499H 10499K |
8 1 6 |
1
|
8/8 2/8 5/8 |
||
CVI13261 | 控制 10499H 10499K |
8 3 8 |
2
|
8/8 5/8 8/8 |
H=含溶血素的疫苗
K=不含溶血素的疫苗
實驗設計
實驗取用 14 頭年齡在 7 至 9 週齡的瑞士藍瑞斯品種豬隻,其中 7 頭以三週為間期,肌肉注射二次 ACTINOVAC 各 2 毫升;另 7 頭則注射安慰劑。二週後所有的豬隻都以鼻腔內接種法接受毒力極強的 App Shope 4074 號菌株的攻擊,觀察並記錄豬隻的臨床反應,所有死亡豬隻都進行剖檢,未死亡的豬隻在攻擊後 48 小時給予安樂死,並進行剖檢。
臨床徵狀
表 7 列出臨床徵狀;人工感染的確在未接種疫苗對照組豬隻引起極嚴重的臨床症狀。所有受 App Shope 4074 號菌株攻擊的豬隻都拒食,其中四頭顯示出呼吸症狀,甚至有一頭在 48 小時內死亡;但在未接種疫苗組中只有兩頭豬隻表現出輕微的呼吸症狀。
表 7:14 頭接受 App 攻擊實驗豬隻的臨床徵狀
臨床徵狀 | 接種組 | 未接種組 |
嘔吐 | 1x+ 6x- |
- 7x- |
呼吸困難 | 2x+ 5x- |
5x+ 2x- |
分泌物 | - 7x- |
1x+ 6x- |
咳嗽 | - 7x- |
1x+ 6x- |
拒食 | - 7x- |
7x+ - |
死亡 | 無 | 1 |
剖檢所見:
表 8 列出死後剖檢的各項發現,剖檢所見和臨床徵狀互為表裡。未接種疫苗組的豬隻,除了一頭沒有嚴重的胸膜肺炎的變化外,其餘各頭在下呼吸道都有明顯的胸膜肺炎病變;接種疫苗組的豬隻只有一頭顯示出肺部的病變。
表 8:以績分系統比較病理所見和細菌學所見
病變 | 接種組 | 未接種組 |
胸腔外部病變 | 0 | 13 |
肺 | 25 | 61 |
滲出物 | 5 | 21 |
胸膜 | 9 | 20 |
心臟 | 0 | 9 |
肺部分離 App | 15 | 18 |
器官分離 App | 0 | 3 |
各組總點數 | 54 | 145 |
血清學的評估
表 9–12 示出抗溶血素和血清型 1、9 及 11 血清學檢測結果。
表 9:以免疫墨點法檢測抗溶血素的結果
組 別 | 豬隻頭數 | 第一次接種前 | 第二次接種前 | 攻擊前 |
接 種 | 7 | 7x- | 4x+ 3x- |
7x+++
|
未 接 種 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
表 10:以補體結合反應檢測抗 App 血清型 1 抗體的檢測結果
組 別 | 豬隻頭數 | 第一次接種前 | 第二次接種前 | 攻擊前 |
接 種 | 7 | 7x- | 4x 1:10 3x 1:20 |
7x 20
|
未 接 種 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
表 11:以補體結合反應檢測抗 App 血清型 9 抗體的檢測結果
組 別 | 豬隻頭數 | 第一次接種前 | 第二次接種前 | 攻擊前 |
接 種 | 7 | 7x- | 3x 1:10 1x 1:20 |
5x 1:10 2x 1:20 |
未 接 種 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
表 12:以補體結合反應檢測抗 App 血清型 11 抗體的檢測結果
組 別 | 豬隻頭數 | 第一次接種前 | 第二次接種前 | 攻擊前 |
接 種 | 7 | 7x- | 4x 1:10 1x 1:20 2x- |
1x 1:10 6x 1:20
|
未 接 種 | 7 | 7x- | 7x- | 7x- |
4.4野外實驗
實驗大綱
在某一App 死亡率相當高的肉豬場進行一項大規模野外實驗,實驗肉豬共分為三組,每組各有 300 頭仔豬。第一組不接種疫苗,做為對照組;第二組接種不含溶血素的 App 菌苗 ( 血清型 1、2、4 及 5b ),第三組接種 ACTINOVAC。在下述時間內死亡的豬隻都進行剖檢,剖檢時特別著重下呼吸道的變化。
接種時間表
第一次接種:10 週齡時
第二次接種:12 週齡時
第三次接種:16 週齡時
結 果
這項野外實驗的實驗結果示於表 12。
表 12:剖檢死於 App 的豬隻時的肺部所見
組 別 | 豬隻 頭數 |
死亡 豬隻 頭數 |
因 App 而 死亡的豬 隻 總 數 |
屍解 所見 |
在第二次接 種後死亡豬 隻 頭 數 |
死亡 豬隻 頭數 |
發生 App 年 齡 |
年齡 |
10 - 12w | 12 - 16w | 18 - 20w | ||||||
對照組 Ⅰ | 300 | 21 | 17 | 17 | 13 | 4 | 9 | 4 |
90710 Ⅱ | 300 | 34 | 10 | 10 | 6 | 4 | 6 | 0 |
90721 Ⅱ | 300 | 7 | 7 | 6 | 2 | 5 | 2 | 0 |
(1)顯示典型的胸膜肺炎徵狀
由肺部病變區分離出 App 血清型 1 及 2。
結 論
本實驗証明接種 ACTINOVAC 組的豬隻在接種後的死亡率較對照組豬隻或接種不含溶血素 App一菌苗組豬隻的死亡率低很多。
5.產品概要
.疫 苗
ACTINOVAC 是一種菌苗次單位疫苗
.含大量溶血素 1
ACTINOVAC 提供的交叉免疫作用能有效對抗數種毒力甚強的 App 血清型 ( 血清型 1、5a、5b、9、10、11 )
.同時也含有溶血素Ⅱ及Ⅲ
ACTINOVAC 對所有其他血清型也提供某種程度的交叉免疫保護作用。
.含有多種具代表性的血清型
ACTINOVAC 含莢多醣類和脂多醣類抗原,所以能提供交叉免疫作用
.保護效果以毒力甚強的血清型 1 菌株攻擊感染証明有效
ACTINOVAC 對毒力極強的 App 血清型 1 的效果業經証明
.保護效果經現場實驗証明有效
ACTINOVAC 的良好臨床效果業經野外實驗証明
.以大量豬隻進行過廣泛的耐受性實驗
豬隻對 ACTINOVAC 有良好的耐受性
.標準劑量
ACTINOVAC 各類豬隻用量均為 2 毫升
結 論
ACTINOVAC 是利用對 App 抗原最新認知所開發出的現代化疫苗,含有刺激豬隻產生保護性免疫力的多種主要抗原,是一種多價疫苗,對多種強毒血清型都能產生保護作用。同時含有影響毒力的重要因子,次單位成分 ( ApxⅠ),這項毒力因子見於 App 血清型 1、5、9、10 及 11。ACTINOVAC 也含有 Apx Ⅱ 和 Apx Ⅲ等次單位,再加上菌體所含的莢膜多醣類和脂多醣抗原,使得 ACTINOVAC 不僅能有效防止其所含血清型菌株的感染,同時對其他血清型也有某種程度的交叉保護作用,能有效預防豬場爆發急性胸膜肺炎。
豬隻接種 ACTINOVAC 後能有效對抗毒力強大的 App 血清型 1,這一點業經人工感染的攻擊實驗以及現場的野外實驗証實。有了對強毒血清型 1 的保護作用就代表 ACTINOVAC 的品質的確有保証,對其他血清型也會有相同的保護效果。
( 有泉行公司提供 )
中國畜牧雜誌第五十六冊合訂本
1996年七月號至1996年十二月號
第 28 卷 (96) 第 12 期 ( 121 ~ 127 )