應用Quinolone 類之 Ofloxacin

於肉用種雞之混合型呼吸器病清除計劃

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　    林子恩　涂慶霖　　　　　　　  李宗玄

國立中興大學獸醫學系　　　　國立中興大學獸醫學研究所

摘　要

　　本實驗利用一肉用種雞群，探討混合型慢性呼吸器病 ( CCRD ) 病原清除計劃之田間試驗。試驗雞在育成期間，分別飲水投與 Ofloxacin ( 每公斤體重 10 毫克 ) 和 Tiamulin ( 每公斤體重 15 毫克 )，每個月投藥一次做為清除計劃之使用藥物，Ofloxacin 投藥組之試驗雞表現明顯的生長成績，低邁可菌 ( MG ) 血清陽性率，良好的產蛋率和孵化率。本實驗亦針對大腸桿菌和 MG 分離株進行 Ofloxacin 及其他 5 種抗菌劑之耐藥性試驗，由試驗結果顯示，每個月使用一次 Ofloxacin 將可建立良好的 CCRD 清除計劃。

緒　言

　　世界上許多地方肉雞場常因感染 MG 所引起之 CRD 而造成重大的經濟損失。近年來，因二次感染 E.  coli 而造成嚴重之 CCRD 有增加的趨勢。CCRD 往往慢慢才出現臨床症狀，病程長，剖檢可見嚴重之氣管炎、纖維素性心包炎及肝包炎。肉雞場多由祖系種雞場垂直感染或到達肉雞場時已受到 MG 感染。

　　MS 感染各年齡層雞隻已散佈世界各地，引起傳染性滑膜炎，少數 4 ~ 6 週齡生長階段之禽類會有呼吸症狀。

　　Fluoroquinolones 是新型人工合成藥物，用於許多家畜、家禽及魚類細菌性疾病之控制。具有相當廣效之抗菌性，包括抗革蘭氏陽性、陰性之細菌及麥可菌。這類新 Quinolones 類藥物，細菌對其有很低的抗藥性，因細菌 DNA gyrase 低變異的特性。

　　大多數由無 MG 感染之雞場引進之小母雞，至產蛋時卻常受到污染。因此原料雞場 MG 之清除計劃對後裔肉雞場 MG 之清除顯得相當重要。許多有關小母雞 MG 之防疫研究正在進行。

　　然而，他們對引起 CCRD 之病原，尚未能有效地控制。此次試驗，希望利用 Ofloxacin 進行種雞場 CCRD 之清除計畫，而維持種雞場無 MG 污染之狀態。

材料和方法

實驗計畫

　　將實驗雞分兩組，分開飼養，以兩種抗 CCRD 藥物處理 ( 表 1 )，C 組則不予藥物處理。

表 1     應用 Ofloxacin 及 Tiamulin 進行混合型呼吸器病 ( CCRD ) 清除計畫肉用種雞之分組

　　於 1 ~ 3、28 ~ 30、56 ~ 58 及 84 ~ 86 日齡時，分別於飲水投藥 3 天，全部實驗時間由 1 日齡至 252 日齡。

藥物

　　OXLADIN ( 為一種 Ofloxacin 之商品 ) 及 TIAMUTIN ( 為一種 Tiamulin 之商品 )，由原製造商 Nippon  Daiichi  Seyaku 及 Sandoz 分別購得。

　　OXLADIN 為含 5%Ofloxacin 之酸性溶液，屬於新 Quinolones 類。對照用藥 TIAMUTIN 則為 Tiamulin 粉末。

實驗用雞

　　乃由 Arbor  Acres ( AA ) 種雞場購得，以限食方式飼養，並依照 AA 公司管理計畫說明書之防疫計畫管理。

觀察及採樣

　　檢查每天之生長情形及攝食情形。於 7、40、68 及 96 日齡時採血，蛋雞則於產蛋期第 231、238、245 及 252 日齡時採血，而於 7、40、68 及 96 日齡時作病原分離。產蛋記錄則由開始產蛋至 36 週齡止，並記錄 33 ~ 36 週齡期間之孵化率及淘汰率。

凝集試驗

　　MG 及 MS 抗體利用快速平板凝集法測試。抗原乃由 INTERVET 公司 ( 荷蘭 ) 購得。

麥可菌之分離

　　麥可菌初代分離及培養乃利用含 10%馬血清、酵母抽出液及抗生素之麥可菌培養液。而麥可菌菌落則培養於二氧化碳培養箱中，利用麥可菌瓊脂培養。以棉棒由氣管及氣囊採樣，再將棉棒投至裝有培養液之試管中，培養於 37℃，5%二氧化碳培養箱中，而 E.  coli 則以 Maclonkey  agar 分離。

藥物敏感試驗

　　E.  coli 及麥可菌藥物敏感試驗以 Bauer - Kirby   disc  zone  method 及最小抑菌 ( MIC ) 濃度及最小殺菌濃度 ( MCC ) 之生長抑制試驗進行。E.  coli 藥物敏感試驗所用之 discs 由 Showa 公司購得，而分離株則由各年齡層所作之分離而得到的。

結　果

MG 及 MS 抗體

　　表 二為 Ofloxacin 治療組與 Tiamulin 治療組及不治療組血清陽性率之比較。產蛋前 A 組 ( 即 Ofloxacin 治療組 ) MG 及 MS 陽性率為 0 ~ 5.3%，而 B 組 ( 即 Tiamulin 治療組 ) 為 0 ~ 20%，而不治療組為 40 ~ 100%。治療組在產蛋期 MG 陽性率為 A 組 0 ~ 5%及 B 組 0 ~ 10%。

表 2     CCRD 清除計畫使用 Ofloxacin (A) 及 Tiamulin (B) 於肉用種雞 MG 及 MS 抗體分佈情形

　　　　　1.由受精卵孵出後小雞之血清

　　　　　2. 7 日齡前沒分組

　　　　　3.無治療對照組

　　　　　4. p<0.05，各年齡有顯著差異

　　　　　5. ---：沒作

麥可菌及大腸桿菌之分離

　　表 三 為各組之分離率。A 組 MG 及 E.  coli 之分離率分別為 0 及 ~ 6.67%，而 B 及 C 組 MG 之分離率為 0 ~ 6.67% 及 33.3 ~ 93.3%，而 E.  coli 之分離率分別為 0 ~ 6.67% 及 33.3 ~ 100%。

表 3      產蛋前麥可菌及大腸桿菌分離結果

　　　　　　　　　1. D：麥可菌及大腸桿菌分離時之日齡

　　　　　　　　　2. p<0.05，各病原分離有顯著性差異

藥物敏感試驗

　　利用 4 個 MG 分離株及 9 個 E.  coli 分離株進行此試驗，結果如表 4 及表 5 所示。6 種測試用藥物為 Ampicillin ( AMPC )、Oxytetracyclin ( OTC )、Doxycyclin ( DOXY )、Ofloxacin ( OFLX )、Erythromycin ( EM ) 及 Ciprofloxacin ( CPFX )。

表 4     麥可菌分離株對 Ofloxacin 及其他抗菌劑之 MIC 及 MCC 試驗

　　　　　*內含藥物濃度　　　　　　　　( ug／ml )

　　　　　　AMPC：Ampicillin　　　　　　　 30

　　　　　　OTC：Oxytetracyclin　　　　　　 200

　　　　　　DOXY：Doxycyclin　　　　　　  200

　　　　　　OFLX：Ofloxacin　　　　　　　   30

　　　　　　EM：Erythromycin　　　　　　　  50　

　　　　　　CPFX：Ciprofloxacin　　　　　　  10

表  5       E. coli 分離株對 Ofloxacin 及其他抗菌藥物藥片之敏感試驗

　　　　　1  AMPC：Ampicillin

　　　　　　OTC：Oxytetracyclin

　　　　　　DOXY：Doxycyclin

　　　　　　OFLX：Ofloxacin

　　　　　　EM：Erythromycin

　　　　　　CPFX：Ciprofloxacin

　　　　　2  抗藥性：－抗藥性

　　　　　　　　　　＋抑制圈達敏感性

產蛋率及孵化率

　　圖 1 表示由產蛋開始至 36 週齡產蛋高峰之平均產蛋率 (%)。A 組於 23 週齡開始產蛋，B 組則於 24 週齡開始，而兩組產蛋高峰時 ( 33 ~ 36 週齡 ) 平均產蛋率分別為 82.83% 及 80.17%。

　　圖 2 表示受精母雞於 33、34、35 及 36 週齡之受精率及淘汰率。

討　論

　　呼吸性疾病之防治得視病因而定，灰塵及氨氣之控制相當重要，另外防止呼吸病原性病毒侵入雞場亦相同重要。對許多生產雞國家，麥可菌感染之防治已成呼吸道疾病控制之重要課題。因為 MG 可藉蛋傳播，故得加強種雞場之防治，一旦種雞受到感染，將終生帶菌，且可藉蛋傳播病原。

　　台灣 MG 血清調查由林及蔡所進行。

　　種雞場高血清陽性率 ( 79.8% ~ 86.7% )，顯示種雞場將造成嚴重之 MG 垂直傳染。此試驗，我們利用抗麥可菌藥物 Ofloxacin 及 Tiamulin 於1–4–8–12 週齡時進 MG 清除計劃。期間於雞隻 1 ~ 3，28 ~ 30、56 ~ 58 及 84 ~ 86 日齡時以飲水給藥 3 天，而兩種藥物均可降低 MG 及 MS 之血清陽性率，此計畫希望能抑制 MG 之污染濃度，調查顯示產蛋雞血清陽性率亦明顯下降，具此推斷清除計畫應可有效改善垂直傳染情形。

　　此次試驗以 4 個 MG 分離株及 9 個 E.vcoli 分離株進行藥物敏感試驗，它們大部分對 Ampicillin、Oxytetracyclin、Doxycyclin 及 Erythromycin ( 表 4 及 5 ) 有抗藥，而屬於新 Quinolone 藥物的 Ofloxacin 及 Ciprofloxacin 則顯示對 MG 及 E.coli 具有良好之抗菌能力。雖然用以試驗之分離株不多，但田間因抗藥性問題面爆發 CCRD 卻時有所聞。

　　對 CCRD 清除計畫對說，新 Quinolone 之 Ofloxacin 顯然是一有效之藥物，以 Ofloxacin 治療的雞，不但 MS 及 MG 血清陽性率降低許多，且於 96 日齡前亦有較低之 MG 及 E. coli 分離率 ( 表 3 )，產蛋開始，可有較高之孵化率 ( 圖 1 ) 且健康雞隻有較低之抗體 ( 表 2 )；肉雞種雞場因有較高之孵化率及較低之淘汰率 ( 圖 2 ) 而可提高利潤。

　　台灣肉雞場感染 CCRD 之可能性相當高是一事實，要減少肉雞損失最有效辦法乃生產更多無 CRD 帶原的雞，在此試驗中，我們建立了 Quinolone 類藥物所進行肉種雞場 ccrd 清除計畫。

　　Ofloxacin 即為抗CCRD 藥物之一例，而療效的評估，有待進一步的實驗調查。

感　謝

　　我們十分感離中興大學郭維貞、趙沁梅及翁欣怡小姐的協助，另外，編者亦非常感謝景旦雞場陳敦男先生提供實驗雞舍及收集受精卵或孵化雞隻。

　　( 原文刊載於：台灣畜牧獸醫學會雜誌種 64 期。翻譯稿提供：台灣第一製藥公司 )

中國畜牧雜誌第五十三冊合訂本

1995年一月號至1995年六月號

第 27 卷 (95) 第 5 期 ( 113 ~ 118 )